Saznajte o laboratorijskim kromatografskim stupovima

Thehromatografski stupacTehnika razdvajanja temelji se na različitim koeficijentima particije između fiksne faze i mobilne faze u smjesi. Stacionarna faza je obično adsorbent, poput silika gela, alumina, poliamida itd., Koji je ravnomjerno popunjen kromatografskom stupcu. Mobilna faza je otapalo koje unosi smjesu u kromatografsku kolonu, poznat i kao eluen. Kako se mobilna faza kreće u kromatografskom stupcu, svaka komponenta ostaje u fiksnoj fazi za različito vrijeme zbog razlike koeficijenta particije, kako bi se postiglo odvajanje.

Kao važan alat za odvajanje, laboratorijski kromatografski stupac reprodukuje vitalnu ulogu u hemijskoj, biološkoj, farmaceutskoj i drugoj poljima. Na osnovu principa kromatografije, odvajanje svake komponente u smjesi može se učinkovito realizirati pomoću razlika koeficijenta particije, adsorpcijskih kapaciteta i rastvorljivosti različitih tvari između fiksne faze i mobilne faze. Ovaj rad će uvesti osnovni princip, tip, metodu odabira, postupak rada i primjenu u različitim poljima laboratorijskog kromatografskog stupca.

Laboratorijski kromatografski stubovi mogu se podijeliti u mnoge vrste prema njihovom principu djelovanja, ispunjavajući materijal, oblik i veličinu.

◆ Klasifikacija po principu akcije

1) Chromatografija stupca adsorpcije: Adsorbent se koristi za odvajanje razlike u adsorpcijskom kapacitetu svake komponente smjese. Izbor Adsorbenta ovisi o prirodi supstanci koja se razdvaja, poput silikagela je pogodna za odvajanje ne-polarnih i polarnih spojeva, a alumina je pogodna za različite vrste spojeva prema kiselini i alkalijama.

2) Chromatografija stupca particije: smjesa je odvojena prema razlici u koeficijentu pregrade između fiksnih i mobilnih faza. Chromatografija stupca particije obično koristi sistem otapala kao mobilnu fazu i prilagođava koeficijent particije promjenom sastava otapala.

3) Chromatografija ionske razmjene: Selektivno adsorpcija i oslobađanje jona u smjesi odvojena je sinskom smolom za razmjenu jona. ION Exchange smole imaju specifične grupe za razmjenu ionske razmjene koje mogu razmjenjivati ​​jone u odvojenoj supstanci.

◆ Poredaj po punjenjem materijala

1) Šilica stupac: Silicijska gel je obično korištena adsorbent, pogodna za odvajanje raznih organskih materija. Silikonski stubovi imaju izvrsnu toplinsku i hemijsku stabilnost i mogu se koristiti preko širokog pH raspona.

2) Stupac Alumina: stupac alumina podijeljen je u kiseo, alkalnu i neutralnu kolonu prema alumina prema kiselini i alkali, pogodnom za različite vrste složenog odvajanja. Stupac Alumina ima snažan adsorpcijski kapacitet za polarne tvari.

3) Poliamidni stupac: Poliamidni stupac ima funkciju adsorpcijske hromatografije i pregradne kromatografije, a pogodno je za odvajanje spojeva koji mogu formirati vodikove veze s poliamidom, poput fenola, kiselina, kinonaca itd.

◆ Poredaj po obliku i veličini

1) Stakleni stupac: Vrsta kromatografskog stupca koja se obično koristi u laboratorijama, s prednostima transparentnosti i lako zapažanja. Veličina staklenog stupca određena je prema količini materijala za odvajanje i stepen poteškoća za odvajanje, a omjer promjera do visine općenito je između 1: 8 i 1:50.

2) Stupac od nehrđajućeg čelika: Stupac od nehrđajućeg čelika ima prednosti otpornosti na koroziju i otpornost na pritisak, koji je pogodan za visokotlačne kromatografske sisteme. Upotreba stupaca od nehrđajućeg čelika relativno je rijetka, ali ima prednosti u određenim uvjetima.

Odabir odgovarajućeg kromatografskog stupca ključan je za postizanje efikasnog odvajanja. Prilikom odabira hromatografskih stupaca potrebno je uzeti u obzir sljedeće faktore:

Laboratorijski kromatografski stubovi imaju širok spektar primjene u velikom broju polja, uključujući, ali ne ograničavajući se na sljedeće:

◆ Odvajanje i pročišćavanje proteina: Hromatografski stupac jedan je od važnih alata za odvajanje i pročišćavanje proteina. Prema razlici veličine proteina, napunjenost imovine i afiniteta, različite kromatografske metode mogu se odabrati za odvajanje i pročišćavanje. Na primjer, hromatografija stupca ionske razmjene pogodna je za proteine ​​odvojene svojstvima punjenja; Kolumnska kromatografija afiniteta koristi specifična obvezujuća svojstva za izoliranje i pročišćavanje ciljanih proteina.

◆ Odvajanje nukleinskih kiselina: Hromatografski stubovi se mogu koristiti i za odvajanje nukleinskih kiselina. Kroz specifične kromatografske metode, molekuli nukleinske kiseline različitih duljina i struktura (poput DNK fragmenata i molekula RNA mogu se učinkovito odvojiti u stupcu kako bi se zadovoljile potrebe kasnije analize nukleinske kiseline, sekvenciranja i drugih eksperimenata.

◆ Odvajanje male molekule spojeva: Metri za drogu, male komponente molekule u prirodnim proizvodima itd., mogu se odvojiti uz pomoć kromatografskih stubova. Prema razlici koeficijenta particije između fiksne faze i mobilne faze, može se odabrati odgovarajuća kromatografska metoda za odvajanje i pročišćavanje malih spojeva molekula. Na primjer, obrnuti-fazni silika gel pogodan je za odvajanje lipofilnih malih molekula; Normalni silika gel pogodan je za odvajanje hidrofilnih malih molekula.

◆ Frakcijski odvajanje polisaharida: Kromatografski stupac može se koristiti za frakcijski odvajanje polisaharida. Prema veličini polisaharidnih molekula i granatirane lančane strukture, mogu se odabrati odgovarajuće hromatografske tehnike za odvajanje polisaharidnih smjesa na različite nivoe, što je korisno za daljnje proučavanje odnosa između strukture i funkcije polisaharida.

◆ Ostale aplikacije. Pored toga, kromatografski stupac igra važnu ulogu u odvajanju i analizi petrohemijskih proizvoda, odvajanja i otkrivanja dodataka za hranu, odvajanje i pročišćavanje kozmetičkih sirovina, klasifikacijskog analize polimernih materijala i razdvajanja i pročišćavanje prirodnih začina.