Primena HPLC analize u rotacionom isparivaču

Tečna hromatografija visokih performansi (HPLC) se takođe naziva tečna hromatografija visokog pritiska, tečna hromatografija velike brzine, tečna hromatografija visoke rezolucije i moderna kolonska hromatografija. To je efikasna i brza tehnologija analitičkog odvajanja koja se brzo razvila 1970-ih i važno je sredstvo modernog testiranja separacije.

Tečna hromatografija visokih performansi (HPLC) koristi tečnost kao mobilnu fazu i usvaja sistem infuzije visokog pritiska za pumpanje mobilne faze kao što je pojedinačni rastvarač sa različitim polaritetima ili mešani rastvor rastvarača i pufera u različitim proporcijama u hromatografsku kolonu sa stacionarnom fazom. Nakon što se komponente u koloni odvoje, one ulaze u detektor na detekciju, kako bi se izvršila analiza uzorka.

Mehanizam odvajanja tečne hromatografije visokih performansi je isti kao kod konvencionalne kolonske hromatografije, ali je pakovanje finije i treba ga potisnuti pumpom visokog pritiska, koja ima visoku efikasnost kolone i veliku brzinu analize. Za razliku od gasne hromatografije, mobilna faza u tečnoj hromatografiji takođe učestvuje u procesu razdvajanja komponenti, a njen sastav, proporcija i pH vrednost mogu se fleksibilno podešavati, uz različite načine separacije. U praksi se retenciona vrijednost i selektivnost uzoraka u hromatografskoj koloni prilagođava promjenom sastava mobilne faze, tako da se različiti uzorci mogu odvojiti.

 

Komponente HPLC analize

 

Kolona: Kolona je glavna komponenta HPLC sistema, koja se koristi za odvajanje jedinjenja u uzorku. Uobičajene kolone za separaciju uključuju kolonu sa reverznom fazom, kolonu za ionsku izmjenu, kolonu za gel filtraciju, itd., a njihov odabir ovisi o svojstvima jedinjenja koje se odvaja i svrhe analize.

Mobilna faza: Mobilna faza je kombinacija rastvarača koji se koriste u HPLC za prolazak uzorka kroz kolonu za odvajanje. Mobilna faza se obično sastoji od mješavine rastvarača, koja može biti jedno otapalo ili mješavina više rastvarača u određenom omjeru. Odabir odgovarajućeg protoka je veoma važan za efekat razdvajanja.

Pumpa: Pumpa se koristi da obezbedi mobilnu fazu i gura je kroz kolonu za odvajanje pod određenim pritiskom. Uobičajene pumpe uključuju pumpu konstantnog pritiska i gradijentnu pumpu. Gradijentna pumpa može ostvariti linearnu ili nelinearnu promjenu sastava mobilne faze, kako bi se postigao bolji efekat razdvajanja.

Injektor: Injektor se koristi za uvođenje uzorka koji se analizira u HPLC sistem. Uzorkovač može biti ručni špric ili automatski uzorkivač. Obično imaju karakteristike tačne zapremine i dobre ponovljivosti kako bi se osiguralo precizno ubrizgavanje uzorka.

Column Oven: Kolonska peć se koristi za kontrolu temperature kolone za odvajanje. Kontrolom temperature, koeficijent distribucije i brzina odvajanja uzorka u koloni se mogu mijenjati, čime se optimizira učinak razdvajanja.

Detektor: Detektor se koristi za detekciju odvojenog jedinjenja i generisanje električnog signala koji se odnosi na njegovu koncentraciju. Uobičajeni detektori uključuju ultraljubičasti detektor apsorpcije, fluorescentni detektor i elektrohemijski detektor. Izbor detektora zavisi od karakteristika jedinjenja koje se analizira i zahteva za osetljivost detekcije.

Sistem za prikupljanje podataka: Sistem za prikupljanje podataka se koristi za prijem, snimanje i analizu signala koje detektor izlazi. Može konvertovati detektovani signal u parametre kao što su vršna površina i vreme zadržavanja, i obezbediti analizu i interpretaciju rezultata.

 

Nakon što se rastvarač ukloni pomoćurotacioni isparivač, dobijeni uzorak je obično koncentriran ili čvrst. Ako želite dalje analizirati ili detektirati spojeve u uzorku, možete ih analizirati tečnom hromatografijom visokih performansi (HPLC).

Opšti koraci za analizu uzoraka nakon rotacijskog isparavanja pomoću HPLC

 

1. Otapanje uzorka: otopiti uzorak nakon rotacijskog isparavanja u odgovarajućem rastvaraču. Prilikom odabira rastvarača treba uzeti u obzir rastvorljivost supstance koja se analizira i zahteve uslova HPLC analize.

2. Priprema standardnog rastvora: Ako je potrebna kvantitativna analiza, može se pripremiti standardni rastvor jedinjenja koje se ispituje za naknadnu korekciju i izračunavanje rezultata analize.

3. Izvršite HPLC analizu: ubrizgajte uzorak u HPLC sistem i postavite odgovarajuću kolonu za razdvajanje, mobilnu fazu i detektor. U skladu sa svrhom analize, odabrati odgovarajuće metode i parametre, kao što su brzina protoka, temperatura i program gradijenta.

4. Prikupljanje podataka i analiza: hromatogram uzorka se prikuplja pomoću HPLC sistema, a ciljno jedinjenje se kvantificira ili identifikuje prema površini pika, vremenu zadržavanja ili drugim povezanim parametrima. Metoda standardne krive i metoda internog standarda mogu se koristiti za kvantitativnu analizu.

5. Tumačenje rezultata: Prema rezultatima analize, jedinjenja u uzorku su kvalitativno i kvantitativno ocijenjena. Prema potrebama, možete generirati izvještaje ili snimati rezultate analize.

 

Primena rotovapa u HPLC analizi ima dva praktična značenja

 

• Koncentracija uzorka: U nekim slučajevima koncentracija uzorka koji se analizira može biti preniska, tako da se hemijski rotacijski isparivač može koristiti za koncentriranje uzorka kako bi se povećala osjetljivost detekcije analita u HPLC-u.
• Uklanjanje rastvarača: U nekim uzorcima rastvarači mogu ometati HPLC analizu, tako da je potrebno ukloniti ili zamijeniti rastvarače u uzorcima rastvaračima pogodnim za HPLC. Laboratorijski rotacioni isparivač može pomoći u uklanjanju rastvarača i transformaciji uzorka u oblik pogodan za HPLC analizu.

 

HPLC analiza irotacioni isparivačsu dvije najčešće korišćene tehnike u hemijskoj analizi i imaju neke razlike i veze u principu i primeni.

 

Razlika

 

Princip: HPLC se zasniva na principu tečne hromatografije, a odvajanje i kvantitativna analiza se realizuju interakcijom između stacionarne faze (kolona) i mobilne faze (rastvarača). Isparivač koristi princip zagrijavanja i rotacije kako bi brzo ispario tekući uzorak i uklonio otapalo, kako bi se uzorak koncentrisao ili promijenilo okruženje rastvarača uzorka.

Polje aplikacije: HPLC se široko koristi u hemiji, farmaciji, životnoj sredini i drugim oblastima, a može se koristiti za odvajanje, identifikaciju i kvantitativnu analizu jedinjenja u složenim smešama; Rotacijsko isparavanje se uglavnom koristi u procesu koncentracije uzorka, uklanjanja otapala i pripreme uzoraka, a obično se koristi u organskoj sintezi, ekstrakciji prirodnih proizvoda, pripremi uzoraka i drugim poljima.

Brzina analize: HPLC analiza obično traje dugo za odvajanje i otkrivanje uzoraka, što može potrajati od nekoliko minuta do nekoliko sati; Vakuumski rotacioni isparivač može brzo ispariti tečne uzorke u kratkom vremenu, obično za samo nekoliko minuta.

 

Povežite se

 

Tretman uzorkom: Oprema za rotacioni isparivač se često koristi za koncentriranje uzoraka ili uklanjanje rastvarača tokom pripreme uzorka kako bi uzorci bili pogodni za dalje metode analize, kao što je HPLC. Efekat i tačnost HPLC analize može se poboljšati koncentrisanjem uzorka i uklanjanjem rastvarača pomoću rotacionog isparivača.

Izbor rastvarača: U HPLC analizi, izbor rastvarača je veoma važan za efekat razdvajanja; Therotacioni isparivačmože pomoći u uklanjanju rastvarača iz uzorka i transformaciji uzorka u oblik pogodan za HPLC analizu. Stoga, rotacioni isparivač može da obezbedi zadovoljavajuće uslove rastvarača za HPLC analizu.

 

Nudimo ručno dizanje rotovap i električno dizanje rotovap, kontaktirajte nassales@achievechem.comda prilagodite svoju vlastitu mašinu za rotacioni isparivač.