Klasična kromatografija stupca
2. hromatografski stupac (vrsta rotacije)
3. hromatografski stupac (priručnik)
*** Cjenik za cijelo iznad, raspitajte nas da dobijemo
Opis
Tehnički parametri
Klasična kromatografija stupcaje osnovna tehnika odvajanja koja se široko koristi u hemiji i biohemiji za pročišćavanje i izolaciju komponenata iz mješavina . radi na principu diferencijalne particije tvari između stacionarne faze u koloni i mobilnoj fazi koja to teče .
Stacionarna faza, obično solidno adsorbent poput silika gela ili alumina, staklo je u stakleni ili plastični stupac . u uzorak, a slijedi dodatak otapala ili mješavine otapala, kao što je mobilna faza u stupcu, komponente smjese različito interakciju s stacionarnom fazom na temelju svoje hemikalije nekretnine, poput polariteta, veličine i afiniteta za adsorbent .
Spojevi sa jačim interakcijama sa stacionarnom fazom kreću se sporije kroz stupac, dok oni sa slabijim interakcijama putuju brže . ove diferencijalne migracije rezultira razdvajanjem smjese u različite pojaseve ili frakcije koje se mogu skupiti pojedinačno .
Procjenjuje se zbog svoje jednostavnosti, svestranosti i ekonomičnosti . Pogodno je za identifikaciju i kvantifikaciju komponenti i odvojenosti za pripremu veće naprednije tvari ., uprkos naprednijim tehnikama poput HPLC-a, ostaje u mnogim laboratorijama zbog njegove pristupačnosti i efikasnosti za širok spektar primjene.
Parametri
Osnovni principi
|
|
Klasična kromatografija stupca, poznat i kao tečna kromatografija, tehnika je za odvajanje rješenja na osnovu razlike u raspodjeli između stacionarne faze (obično solidno-faza (otapala) ., a zatim se komponente smjese dodatno odvojene u diskretne komponente pomoću različite distribucije Koeficijenti između fiksne faze i mobilne faze . U koloni kromatografiji obično se sastoji od poroznog čestica, alumina, aktiviranog ugljika itd. Stacionarna faza i njen odabir trebaju biti određeni prema polaritetu Solute i adsorpcijskih karakteristika adsorbenta . U procesu razdvajanja, smjesa se uvodi u kolonu koja sadrži stacionarnu fazu, komponente se pomakne na kolonu na različitim fazom stacionarnih faza, pa se polako pomjeraju ., međutim, komponenta s slabim polaritetom lako se odvodi mobilne aplikacije faza, a kretanja brzina je brže . na taj način, svaka komponenta formira brojne pojaseve u boji na stupcu kako bi se postiglo odvajanje . |
Azinozna kiselina Analiza
Azinozna kiselina se obično vrši pomoću tečne hromatografije, od kojihKlasična kromatografija stupcaje uobičajena tehnika . u ovoj metodi, a aminokiseline se može pretvoriti u derivatizaciju i izreza ne moraju se pretvoriti u derivalizaciju i otkrivanje aminokiselina na kromatografskom stupcu . aminokiseline.
- Priprema uzorka: Proteinski uzorak je hidroliziran za aminokiseline . To se može postići kiselinama hidrolizom ili enzimskom hidrolizom . hidrolizirani uzorak potreban je pravilno predobradnici, kao što su uklanjanje ostataka proteina.
- Derivatizacija: Da bi se poboljšala osjetljivost detekcije i odvajanja odvajanja aminokiseline, derivatizacija aminokiseline su potrebna dve vrste aminokiselina: pre - derivacija stupaca . Koloneni derivaci za pretkopne uključuju fenilen diformaldehyde (OPA), metil hlorofluorence (FMOC-CI), fenil izoticijanat (PITC), dansill hlorid (Dansyl-ci), 2, 4- dinitrofluorobenzene (F,7NB), itd. .
- Izbor stupaca: Odaberite stupac pogodan za analizu aminokiselina, poput stupca ionske razmjene, stupac C18, stupac C8, itd. .
- Podešavanje kromatografskog stanja: Podesite odgovarajuće hromatografske uslove, uključujući mobilnu fazu, protok, gradijentni program, itd. . Common Mobile FAze uključuju pufere koji sadrže ionske parove, kao što su Formate Buffers .
- Uzorak nakon hidrolize i derivatizacije ubrizgava se u kromatograf za analizu . uspoređujući vršni prostor i koncentraciju svake aminokiseline u uzorku na standardnoj krivulji, uzorkovanje aminokiseline u uzorku može se kvantitativno analizirati .
- Obrada podataka: Prema vršnim područjima i koncentracijskim podacima dobivenim iz analize, izračunava se sadržaj svake aminokiseline u uzorku, a podaci se obrađuju i rezultat se prijavljuje .
Mnogo je primjera aplikacija u analizi aminokiselina, a dolje navedeno je nekoliko specifičnih slučajeva:
- Otkrivanje bitnih aminokiselina: upotreba može otkriti sadržaj esencijalnih aminokiselina, poput izoleucina, leucina, lizina itd. {. ove aminokiseline igraju vitalnu ulogu u ljudskom tijelu i važne su za održavanje vitalne aktivnosti i zdravlja.
- Određivanje aminokiselina u kineskoj medicini, na primer, na primer; kiseline .
- Određivanje aminokiselina u hrani: na primer aminokiselina u hrani takođe je jedna od važnih aplikacijskih područja . u okviru novorođenčadi u obliku prehrambenog i mlečnog jezika ili stupca s ekvivalentnim performansama . u istovremeno, metoda se može koristiti i za određivanje sadržaja aminokiselina u Ostala hrana koja pruža važnu osnovu za kontrolu kvaliteta hrane i ishranu hrane .
U analizi aminokiselina potrebno je odabrati odgovarajuće reagense iz derivalizacije i uvjeti iz derivatizacije za poboljšanje osjetljivosti i tačnosti otkrivanja .
Izbor stupca i postavka kromatografskih uvjeta ima važan utjecaj na efekt odvajanja i potrebno je optimizirati u skladu sa specifičnim uzorkom i analitičkim potrebama .
U procesu analize potrebno je obratiti pažnju na uslove pripreme i skladištenja uzoraka kako bi se izbjegao utjecaj kontaminacije uzorka i degradacije na rezultate analize .
Šta je derivatni tretman
Derivatizacija je važna uzorka tehnika prethodne obrade uKlasična kromatografija stupca, koji ima za cilj poboljšati učinak otkrivanja i odvajanja analitika . Sljedeći je detaljno objašnjenje procesa derivalizacije:
|
► Svrha izvedenog liječenja 1) Poboljšane performanse otkrivanja: Upoređivanjem funkcionalnih grupa koje su lako otkriti, analit generira jači signal na detektoru, poboljšavajući osjetljivost i tačnost otkrivanja . |
|
|
|
► Vrsta derivatnog tretmana 1) Izvođenje pred-stupca: |
|
Izvođenje post stupca ima prednosti dobrog oblikovanja i manje utjecaja na faktore, ali zahtijeva dodatne instrumente i opremu . 1) Poboljšana osjetljivost otkrivanja: u analizi aminokiselina, uvođenje lako otkrivenih funkcionalnih grupa (poput fluorofora) putem derivalizacije pred-stupca može povećati signalnu jačinu aminokiselina na detektoru, čime se poboljšava osjetljivost otkrivanja . |
|
Klasična kromatografija stupca, temeljna tehnika u razdvajanju, nastavlja se razvijati sa napretkom u materijalima i metodologiji, osiguravajući njegovu relevantnost u istraživanjima i industrijskim primjenama .
Jedno obećavajuće smjer je integracija romanskih stacionarnih faza. u materijalnoj nauci dovele do izrade visokokvalitetnih materijala za pakiranje sa poboljšanom selektivnošću, stabilnošću i efikasnošću . tih materijala omogućavaju bolju rezoluciju i brže odvajanja za visoko-propusnost u industriji kao što su farmaceutski analizu i biotehnologija .
Nadalje, sve se više kombinuje sa naprednim tehnikama otkrivanja, kao što je masovna spektrometrija, za poboljšanje osjetljivosti i preciznosti . Ova hibridizacija omogućava sveobuhvatniju analizu složenih mješavina, širenjem primjene tehnike u poljima poput metabolomije i proteomike .
Zaključno, budućnost leži u svojoj adaptaciji novim materijalima, minijaturizaciji i integraciji sa resetičnim metodama otkrivanja, osiguravajući da je njegova kontinuirana korisnost u modernim naučnim i industrijskim pejzaži .
Popularni tagovi: Klasična kolona hromatografija, Kina klasična kolona hromatografija, dobavljači, tvornica
Pošaljite upit
